期刊简介
本杂志是通过全国各地邮局公开发行的直辖市级（省级）综合性医学科技期刊，现为月刊，128。目前同国外30种杂志建立了互换刊物关系。《重庆医学》杂志立足重庆，面向全国，放眼世界，快、准、精、广地报导医学领域的新成果、新动态、新技术、新经验。《重庆医学》助你用知识发明创新，用知识开拓市场，用知识创造财富，用知识改变命运。
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- 杂志名称：重庆医学杂志
- 主管单位：重庆市卫生和计划生育委员会
- 主办单位：重庆市卫生信息中心,重庆市医学会
- 国际刊号：1671-8348
- 国内刊号：50-1097/R
- 出版周期：旬刊
期刊荣誉：中国科技论文统计源期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 知网收录(中), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏
抗组氨酸标签单克隆抗体的制备、鉴定及应用
戚大梁；王强；易维京
关键词：抗体, 单克隆, 酶联免疫吸附测定, 印迹法, 蛋白质, 组氨酸标签
摘要：目的：制备特异性抗组氨酸标签（His-tag）的单克隆抗体（mAb）并进行鉴定。方法以合成的15个组氨酸的多肽耦联牛血清清蛋白（BSA）为抗原免疫Balb/c小鼠，按常规方法进行细胞融合。采用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）筛选阳性克隆及有限稀释法进行克隆化，用Protein G柱亲和纯化抗体及ELISA 检测纯化抗体的效价、相对亲和力及抗体亚类，用ELISA及Western blotting对mAb的特异性进行鉴定，并与含His-tag的重组蛋白特异性抗体配对建立双抗夹心ELISA定量检测对应的重组蛋白。结果筛选出5株能稳定分泌抗 His-tag的杂交瘤细胞株，抗体亚类均为IgG1（κ），其中1-G2亲和力高（1．27×1010），并且1-G2在ELISA及 Western blotting中能与不同类型的含 His-tag的重组蛋白结合，能与降钙素原（PCT ）抗体构建双抗夹心ELISA定量检测含 His-tag的PCT重组蛋白，灵敏度达到4．6 ng/mL。结论成功制备了特异性好、亲和力高、能稳定分泌抗His-tag的mAb ，该抗体能应用于ELISA及 Western blotting等多种 His-tag的检测方法，为蛋白质研究检测、定位、相互作用等提供了工具。
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