期刊简介
本杂志是通过全国各地邮局公开发行的直辖市级（省级）综合性医学科技期刊，现为月刊，128。目前同国外30种杂志建立了互换刊物关系。《重庆医学》杂志立足重庆，面向全国，放眼世界，快、准、精、广地报导医学领域的新成果、新动态、新技术、新经验。《重庆医学》助你用知识发明创新，用知识开拓市场，用知识创造财富，用知识改变命运。
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- 杂志名称：重庆医学杂志
- 主管单位：重庆市卫生和计划生育委员会
- 主办单位：重庆市卫生信息中心,重庆市医学会
- 国际刊号：1671-8348
- 国内刊号：50-1097/R
- 出版周期：旬刊
期刊荣誉：中国科技论文统计源期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 知网收录(中), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏
人microRNA-21真核过表达载体的构建及其在 HepG2．2．15细胞中上调c-myc基因的表达
林永敏；任广立；张卫云；蔡启茵；谢聪；马恒颢
关键词：微RNA-21, 遗传载体, 基因, c-myc, 乙型肝炎相关性肝肿瘤, HepG2 .2 .15细胞
摘要：目的：构建人微小RNA‐21（microRNA‐21，miRNA‐21）真核过表达载体pmR‐21，探讨其在 HepG2．2．15细胞中对c‐myc基因表达的调控作用。方法 PCR扩增miRNA‐21的前体基因片段（pre‐miRNA‐21），双酶切后连接到pmR‐mCherry载体上，通过双酶切和测序验证重组载体的准确性；将重组载体转染到 HepG2．2．15细胞中为实验组，另设空载体组（转染 pmR‐mCherry空质粒组），空白组（未转染组），阳性对照组（HepG2细胞），24 h后观察载体荧光蛋白表达情况，流式细胞术检测转染效率，实时荧光定量PCR评估miRNA‐21的表达情况；转染72 h后，RT‐PCR和Western blot检测c‐myc mRNA及蛋白表达水平；CCK‐8法检测各组细胞增殖情况。结果经双酶切和测序验证，目的基因片段插入载体中；实验组及空载体组转染24 h后细胞内可见强荧光，转染效率大于50％；实验组细胞 miRNA‐21表达较空载体组、空白组水平升高；转染72 h后实验组细胞c‐myc mRNA表达较空载体组、空白组升高；实验组细胞增殖快于空载体组及空白组，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论成功构建miRNA‐21真核过表达载体 pmR‐21，该重组载体可稳定表达 miRNA‐21；miRNA‐21可上调 c‐myc基因的表达，c‐myc基因是miRNA‐21发挥促癌作用的靶点之一。
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