期刊简介
本杂志是通过全国各地邮局公开发行的直辖市级（省级）综合性医学科技期刊，现为月刊，128。目前同国外30种杂志建立了互换刊物关系。《重庆医学》杂志立足重庆，面向全国，放眼世界，快、准、精、广地报导医学领域的新成果、新动态、新技术、新经验。《重庆医学》助你用知识发明创新，用知识开拓市场，用知识创造财富，用知识改变命运。
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- 杂志名称：重庆医学杂志
- 主管单位：重庆市卫生和计划生育委员会
- 主办单位：重庆市卫生信息中心,重庆市医学会
- 国际刊号：1671-8348
- 国内刊号：50-1097/R
- 出版周期：旬刊
期刊荣誉：中国科技论文统计源期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 知网收录(中), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏
NDY1shRNA真核表达质粒构建及其在卵巢癌A2780细胞中的稳定表达
卢芳芳；况燕；徐朝欢；王旗；李美仪
关键词：卵巢肿瘤, NDY1, 质粒构建, A2780细胞
摘要：目的：构建NDY1 shRNA真核表达载体，并获得稳定表达shNDY1质粒的卵巢癌A2780细胞。方法根据Gen‐Bank数据库提供的NDY1基因核苷酸序列，设计并合成靶向干扰NDY1基因的小发夹RNA（shRNA）序列，插入表达载体获得重组质粒pGPU6／GFP／Neo‐shNDY1。重组质粒测序鉴定正确后，脂质体介导转染A2780细胞，经G418筛选及有限稀释法获得稳定转染细胞，采用实时定量聚合酶链反应法（RT‐qPCR）和蛋白免疫印迹法分别检测A2780稳定转染细胞NDY1 mRNA及蛋白表达。结果重组质粒测序正确，转染shNDY1后，A2780细胞mRNA及蛋白表达水平分别下降（72．89±4．83）％及（55．85±4．84）％，与对照组相比差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论成功构建 pGPU6／GFP／Neo‐shNDY1真核表达质粒，并获得shNDY1稳定转染的卵巢癌A2780细胞，为细胞水平研究NDY1与卵巢癌的关系奠定实验基础。
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