期刊简介
本杂志是通过全国各地邮局公开发行的直辖市级（省级）综合性医学科技期刊，现为月刊，128。目前同国外30种杂志建立了互换刊物关系。《重庆医学》杂志立足重庆，面向全国，放眼世界，快、准、精、广地报导医学领域的新成果、新动态、新技术、新经验。《重庆医学》助你用知识发明创新，用知识开拓市场，用知识创造财富，用知识改变命运。
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- 杂志名称：重庆医学杂志
- 主管单位：重庆市卫生和计划生育委员会
- 主办单位：重庆市卫生信息中心,重庆市医学会
- 国际刊号：1671-8348
- 国内刊号：50-1097/R
- 出版周期：旬刊
期刊荣誉：中国科技论文统计源期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 知网收录(中), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏
Wip1基因重组慢病毒表达载体的构建及其对乳腺癌MCF-7细胞生物学行为的影响研究
李宗涛；顾笑梅；孙国贵；李娟；张浩
关键词：Wip1, 乳腺肿瘤, 细胞凋亡, 基因转染
摘要：目的 构建Wip1基因重组慢病毒表达载体,研究其对乳腺癌细胞生物学行为的影响.方法 以慢病毒感染方法将Wip 1的短发夹状RNA(shRNA)转入乳腺癌MCF-7细胞.采用qRT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测转染前后细胞Wip1 mRNA、蛋白的表达,MTT法、流式细胞术及Transwell侵袭实验检测Wip1-shRNA对MCF-7细胞增殖、凋亡、周期及侵袭转移的影响.筛选具有抑制p53基因表达的干扰RNA分子p53dsRNA,并分析其干扰后对乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移的影响.结果 转染48 h后,Wip1-shRNA组细胞荧光较强,NC-shRNA组较弱.Wip1-shRNA组细胞Wip1 mRNA和蛋白的表达分别为0.291±0.025、0.203±0.021与NC-shRN A组0.954±0.090、0.963±0.092比较,差异有统计学意义(P<0.05).两组各时间点细胞存活率比较,差异有统计学意义(P<0.05).NC-shRNA组早期与晚期细胞的凋亡数少于Wip1-shRNA组,差异有统计学意义(P<0.05).NC-shRNA组细胞G0+G1期、S期细胞数分别为53.5±3.6、27.3±1.5,Wip1-shRNA组分别为72.3±5.2、14.6±0.8,差异有统计学意义(P<0.05).Transwell侵袭转移结果表明,NC-shRNA组细胞的穿膜数均多于Wip1-shRNA组(P<0.05).对照组细胞中p53 mRNA的表达、细胞侵袭转移的穿膜数与p53dsRNA组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 RNA干扰可有效抑制乳腺癌MCF-7细胞Wip1表达,Wip1可能通过调控蛋白表达影响乳腺癌细胞增殖、凋亡、周期与侵袭转移,p53dsRNA干扰p53基因下调后增加乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移的能力.
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