期刊简介
本杂志是通过全国各地邮局公开发行的直辖市级（省级）综合性医学科技期刊，现为月刊，128。目前同国外30种杂志建立了互换刊物关系。《重庆医学》杂志立足重庆，面向全国，放眼世界，快、准、精、广地报导医学领域的新成果、新动态、新技术、新经验。《重庆医学》助你用知识发明创新，用知识开拓市场，用知识创造财富，用知识改变命运。
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- 杂志名称：重庆医学杂志
- 主管单位：重庆市卫生和计划生育委员会
- 主办单位：重庆市卫生信息中心,重庆市医学会
- 国际刊号：1671-8348
- 国内刊号：50-1097/R
- 出版周期：旬刊
期刊荣誉：中国科技论文统计源期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 知网收录(中), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏
人源CerS2重组腺病毒构建及其对肝癌细胞HepG2细胞周期的作用
杨小理；钱玥；欧阳旭红；向加林；杨艳；王凤学
关键词：神经酰胺合酶, 重组腺病毒, 细胞周期, p27, 激光扫描共聚焦显微镜
摘要：目的 探讨神经酰胺合酶2(CerS2)过表达对肝癌细胞HepG2细胞周期的影响及可能机制.方法 化学合成人源CerS2基因CDS区并构建重组穿梭质粒pDC315-CerS2-绿色荧光蛋白(GFP),采用Admax系统将成功构建的CerS2重组穿梭质粒与骨架质粒共转染HEK293细胞,通过Cre/loxP实现重组,并进行扩增、纯化及滴度测定.将正确构建的Adv-CerS2-GFP重组腺病毒与空载分别感染肝癌细胞HepG2(即对照组、空载组、实验组),激光共聚焦显微镜定位CerS2-GFP融合蛋白的表达,流式细胞术PI法检测各组细胞周期的分布;RT-qPCR、Western blot法检测各组细胞CerS2、p27mRNA及蛋白表达水平.结果 经测序分析验证重组腺病毒构建成功.HepG2实验组CerS2、p27mRNA、蛋白相对表达水平较对照组、空载组明显增加(P＜0.01).对照组与空载组细胞周期时相分布差异无统计学意义(P＞0.05),实验组细胞较对照组、空载组G0/G1期百分比明显增加(P＜0.01);G2/M、S期明显减少(P＜0.01).结论 成功构建人源CerS2重组腺病毒且过表达的CerS2导致肝癌细胞HepG2细胞周期G0/G1期阻滞,其机制可能是通过上调p27从而抑制肝癌细胞的生长与增殖.
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